Trypsin 1:250
簡要描述:
Trypsin 1:250 豬源胰蛋白酶1:250 細胞分離與流式分析,CAS:9002-07-7,來源于胰腺的一種絲氨酸蛋白酶,由223個氨基酸殘基組成的單鏈多肽,底物特異性是帶正電荷的賴氨酸和精氨酸側鏈。胰酶主要切割賴氨酸和精氨酸羧基端,當兩者之一緊隨為脯氨酸的情況除外。另外,當切割位點任一邊緊鄰酸性殘基,胰酶水解速率也會減緩。
產品時間:2024-03-21
Trypsin 1:250, Powder (Porcine)
豬源胰蛋白酶1:250(粉末)
產品標簽
Trypsin 1:250 胰酶;Collagenase NB 4 膠原酶NB4(標準級別);Trypsin-EDTA (0.25%);Dispase II 中性蛋白酶;Roche;CAS:9001-12-1;
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
Trypsin 1:250 (Porcine) 豬源胰蛋白酶1:250(粉末) | MX2002-25G | 25g | 135 |
Trypsin 1:250 (Porcine) 豬源胰蛋白酶1:250(粉末) | MX2002-100G | 100g | 360 |
產品描述
胰蛋白酶(胰酶,Trypsin),CAS:9002-07-7,來源于胰腺的一種絲氨酸蛋白酶,由223個氨基酸殘基組成的單鏈多肽,底物特異性是帶正電荷的賴氨酸和精氨酸側鏈。胰酶主要切割賴氨酸和精氨酸羧基端,當兩者之一緊隨為脯氨酸的情況除外。另外,當切割位點任一邊緊鄰酸性殘基,胰酶水解速率也會減緩。
胰蛋白酶(胰酶,Trypsin),以無活性的胰蛋白酶原(Trypsinogen)形式分泌于胰腺中,通過切割其末端六肽而得到活化,產生天然單鏈形式的β-胰酶(β-Trypsin),隨后進行有限的自發(fā)裂解產生具水解活性的α-Trypsin(由二硫鍵共價連接的二條肽鏈組成)。胰酶水解活性可被多種化合物所抑制,有1)來源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制劑;2)銀離子;3)有機磷化合物,如氟磷酸異丙酯DFP;4)特定蛋白酶抑制劑,如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、PMSF、TLCK等;
本品是來源于豬胰腺的胰蛋白酶凍干粉,經γ射線處理滅活病毒,經過豬細小病毒和支原體檢測。基于標準測定方法的酶活力為250 units/mg,即1:250。廣泛用于細胞傳代,對貼壁細胞進行消化以制備單細胞懸液,常用的工作濃度是0.025-0.5%(w/v)。也可聯合其他蛋白酶如膠原酶、彈性蛋白酶一起使用,以消化組織。
產品特性
- EC NO:3.4.21.4
- CAS NO:9002-07-7
- 同義名:Trypsin, from Porcine Pancreas; Trypsin Powder, Porcine 1:250; Tryptase; Tryptar; Cocoonase; Parenzyme; Parenzymol;
- 分子量:23.4 kDa
- 螯合劑:無EDTA
- 酚紅指示劑:無酚紅
- 外觀:白色至類白色粉末
- 溶解性:溶于水,幾乎不溶于乙醇和甘油
- zuijia工作溫度:37°C
- zuijia工作pH:7.0-9.0
- 酶活性:根據美國藥典專論規(guī)定的胰蛋白酶活性測定條件(25°C 10 min, pH 7.6),1 g 胰蛋白酶能消化 250 g 酪蛋白底物。
使用方法
1. 胰酶儲存液(2.5%,w/v)的配制
1.1 稱取2.5g胰酶粉末溶于100ml 不含鈣鎂的平衡鹽緩沖液,如HBSS(Hank′s Balanced Salt Solution),并調整pH在7.4-7.6,此時得到的即2.5%胰酶儲存液,置于4℃短時間保存,3個月相對穩(wěn)定。建議分裝凍存,利于長期保存。解凍后可能會出現少量沉淀,屬于正?,F象,不會影響使用效力。
1.2 細胞的消化可以直接用胰酶溶液,但常使用胰酶-EDTA溶液,因為EDTA是一種II價金屬離子螯合劑,
【①】:胰酶用于細胞傳代的工作濃度范圍為0.025%-0.5%,具體濃度的選擇主要受胰酶活性、孵育時間和細胞系類型幾個方面影響。若用過高濃度消化過長時間,會破壞細胞膜結構,進而殺死細胞。當對使用濃度把握不大,建議先使用低濃度消化,慢慢的摸索出合適的工作濃度。
【注②】:胰酶-EDTA溶液的配制(僅作參考,根據需要的實際胰酶濃度來調整)
無Ca2+、Mg2+及酚紅的平衡鹽溶液 | 485ml |
胰酶儲存液(2.5%,w/v) | 10 ml |
EDTA溶液(2%,w/v) |
|
2. 貼壁細胞消化(培養(yǎng)板)【詳見maokangbio】
注意事項
1)胰蛋白凍干粉產品常遇到的活性定義及其轉換,
1 BAEE Unit:在25℃,pH 7.6 的條件下,以BAEE為底物,3.2 ml的反應體系中,A253吸光值每分鐘會發(fā)生0.001的變化即為一個酶活單位。
1 TAME Unit: 在25℃,pH 8.2,0.001M Ca2+條件下,每分鐘水解 1μmol p-toluenesulfonyl-L-arginine methyl ester(TAME)的用量。
1 USP Unit:在條件下,每分鐘引起吸光值發(fā)生0.003的變化的樣品活性。
1 TAME unit = 19.2 USP or NF units = 57.5 BAEE Unit
2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作,主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產等領域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質產品。
Trypsin 1:250 豬源胰蛋白酶1:250 細胞分離與流式分析
Trypsin 1:250 豬源胰蛋白酶1:250 細胞分離與流式分析