Y1HGold酵母化學感受態(tài)細胞
簡要描述：
Y1HGold酵母化學感受態(tài)細胞是Clontech GAL4-AbA酵母單雜交系統(tǒng)用的菌株，MATα型，能直接轉化質粒進行文庫篩選。Y1HGold-GAL4酵母單雜交系統(tǒng)需要兩種質粒配套使用，分別為pAbAi和pGADT7。
產(chǎn)品時間：2024-03-20
打印當前頁Y1HGold Chemically Competent Cell
酵母菌化學感受態(tài)細胞
溫馨提示
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產(chǎn)品關鍵詞：
GAL4-AbA酵母單雜交系統(tǒng)；Y1HGold；pAbAi；pGADT7；Ar Qual；X-α-Gal ；Aureobasidin A （AbA）；金擔子素；
產(chǎn)品訂購：
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格（元） |
MF2362-1000UL | Y1HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化學感受態(tài)細胞 | 10×100μl | 290 |
MF2362-5000UL | Y1HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化學感受態(tài)細胞 | 50×100μl | 1320 |
產(chǎn)品組分：
組分編號 | 組分名稱 | 保存 | 貨號（規(guī)格） | |
MF2362-1000UL | MF2362-5000UL | |||
MF2362-A | Y1HGold Competent Cell | -80℃ | 10×100μl | 50×100μl |
MF2362-B | pGADT7 Control Vector (10ng/μl) | -80℃ | 10μl | 10μl |
MF2362-C | Carrier DNA (5μg/μl) | -20℃ | 100μl | 500μl |
MF2362-D | PEG/LiAC Solution | +4℃ | 5ml | 25ml |
產(chǎn)品描述
酵母單雜交是在酵母雙雜交的基礎上發(fā)展起來，不同于雙雜交用來研究蛋白-蛋白間的相互作用，單雜交主要用于研究蛋白和DNA的相互作用。
Y1HGold是Clontech GAL4-AbA酵母單雜交系統(tǒng)用的菌株，MATα型，能直接轉化質粒進行文庫篩選。
Y1HGold-GAL4酵母單雜交系統(tǒng)需要兩種質粒配套使用，分別為pAbAi和pGADT7。前者篩選標志為Ura，用于表達pBait-AbAi構建子（通過將bait-DNA 單拷貝或串聯(lián)重復序列克隆到pAbAi載體所得）；后者篩選標志為Leu，用于表達GAL4 AD與誘捕蛋白（prey）的融合蛋白。Y1HGold-GAL4酵母單雜交系統(tǒng)的工作原理在于：基因組整合有pBait-AbAi的酵母報告菌株，當誘捕蛋白（prey）結合到誘餌序列（bait-DNA），GAL4 AD會激活AUR1-C報告基因的表達，這一表達使得細胞能夠在含篩選抗生素金擔子素（Aureobasidin A，AbA）的培養(yǎng)基上生長。與傳統(tǒng)的營養(yǎng)缺陷報告基因相比，AUR1-C（AbAr）在很低濃度（100-200 ng/ml）下即可以有效殺死非抗性克隆，大大降低背景克隆生長。這一優(yōu)勢也可降低酵母單雜交假陽性發(fā)生的概率。
本品為經(jīng)特殊工藝制備的Y1HGold酵母菌化學感受態(tài)細胞，用pGADT7質粒檢測轉化效率＞104cfu/μg DNA。且在-80℃能穩(wěn)定保存三個月。
基因型
MATα, ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, met-, MEL1
使用方法
- 取100 µl冰上融化的Y1HGold化學感受態(tài)細胞，依次加入預冷的目的質粒2-5 µg，Carrier DNA （95-100℃ 孵育5 min，快速冰浴。重復一次。）10 µl，PEG/LiAc 500µl，用槍吹打幾次充分混勻，30℃水浴30 min（在15min時翻轉6-8次混勻）。
- 之后將管子放42℃水浴15 min（在7.5min時翻轉6-8次混勻）。
- 5000 rpm離心40s棄上清，用400 µl ddH2O重懸沉淀，離心30s棄上清。
- 用50 µl ddH2O重懸，涂板，放入恒溫培養(yǎng)箱29℃培養(yǎng)48-96 h。
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MS6304-250G | YPDA Medium YPDA液體培養(yǎng)基 | 250g |
MS6311-467G | Minimal SD Agar Base SD瓊脂基礎培養(yǎng)基 | 467g |
MS6312-267G | Minimal SD Base SD基礎培養(yǎng)基 | 267g |
MS6317-10G | DO Supplement -Leu | 10g |
MS6320-10G | DO Supplement -His/-Leu | 10g |
MS6334-10G | DO Supplement -Leu/-Met/-Trp | 10g |
MS6342-10G | DO Supplement -His/-Leu/-Met/-Trp | 10g |
MS0002-1ML | Aureobasidin A (AbA) 金擔子素A（1 mg/ml） | 1ml |
MF2501-200T | Yeast Transformation Kit 酵母轉化試劑盒 | 200T |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
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Y1HGold酵母化學感受態(tài)細胞
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